PCR 混合液计算器
将 PCR 混合液按任意反应数量放大。设置每反应用量、反应数量和移液损耗余量，即可得到每种试剂的总用量。
%
| 成分 | 每反应用量（µL） | 总量（µL） |
|---|---|---|
| 10X reaction buffer | 27.5 µL | |
| dNTP mix (10 mM) | 5.5 µL | |
| Forward primer (10 µM) | 5.5 µL | |
| Reverse primer (10 µM) | 5.5 µL | |
| Taq polymerase | 1.38 µL |
混合液总体积45.38 µL
每管分装 4.13 µL 混合液，然后加入模板。
使用方法
PCR 混合液将各反应共用的所有试剂——缓冲液、dNTP、引物和聚合酶——集中于一管中，只需移液一次即可等量分装。本计算器会将每反应用量乘以反应数量，并加上一定百分比的损耗余量，以弥补移液过程中的少量损失。
典型的损耗余量为 5%–10%：多配制几份反应所需的混合液，可确保最后一管仍能获得完整、准确的体积。模板 DNA 需单独加入每管（而非加入混合液中），因此显示的每管混合液体积是加入样品前应分装的量。
示例
- 10 个反应、损耗余量 10% 时，每种试剂放大 ×11。
- 模板需单独加入每管，而非加入共用的混合液中。
- 损耗余量用于弥补移液损失，确保最后一管仍是满量。
常见问题
- 什么是 PCR 混合液？
- 将各反应共用的所有试剂预先混合于一管中，再等量分装，使每管完全一致，同时减少移液次数。
- 为什么要加损耗余量？
- 每次移液都会损失少量体积。多配制 5%–10% 可确保最后几个反应仍能获得完整、准确的用量。
- 模板是否包含在混合液中？
- 不包含——模板 DNA 因样品而异，需在分装共用混合液后再单独加入每管。
- 可以修改用量吗？
- 可以。在表格中编辑任意每反应用量以匹配你的方案，总量会自动更新。