OD260 转浓度计算器
将分光光度计在 260 nm 处的读数转换为核酸浓度。输入吸光度和稀释倍数,选择核酸类型,也可以加入 A280 读数以获得纯度比。
浓度50 µg/mL
- ng/µL
- 50
- A260/A280
- —
使用方法
核酸在 260 nm 处吸收紫外光,其吸光度与浓度成正比。一个吸光度单位(A260 = 1,光程 1 cm)大约对应 50 µg/mL 的双链 DNA、33 µg/mL 的单链 DNA,或 40 µg/mL 的单链 RNA。因此浓度等于 A260 × 稀释倍数 × 类型系数,又因为 1 µg/mL 等于 1 ng/µL,这两个单位的数值相同。
输入测得的吸光度和所用的稀释倍数,并选择核酸类型。如果你还测量了 280 nm 处的吸光度,输入该值即可得到 A260/A280 纯度比——纯 DNA 约为 1.8,纯 RNA 约为 2.0,数值偏低则提示蛋白质或苯酚污染。
示例
- dsDNA 的 A260 为 1.0(稀释倍数 1)= 50 µg/mL。
- RNA 的 A260 为 0.5,稀释 100 倍:0.5 × 100 × 40 = 2000 µg/mL。
- A260/A280 约为 1.8 表示 DNA 纯度较高。
常见问题
- A260 是如何得出浓度的?
- 核酸在 260 nm 处的吸光度与浓度成正比。将吸光度乘以稀释倍数和特定类型系数(每个 OD 对应 50、33 或 40 µg/mL)即可得到浓度。
- 为什么系数是 50、33 和 40?
- 这些是通过实验确定的数值,表示在 1 cm 光程下使 260 nm 处吸光度为 1 所需的双链 DNA、单链 DNA 和单链 RNA 的量。
- A260/A280 比值是什么?
- 它是一个纯度指标。纯 DNA 的比值接近 1.8,纯 RNA 接近 2.0;比值明显偏低则提示可能存在蛋白质或苯酚污染。
- µg/mL 与 ng/µL 相同吗?
- 在数值上是相同的。一微克每毫升等于一纳克每微升,因此两种单位下的浓度数值相同。