HPLC 方法转移计算器
在保持分离效果等效的前提下，将 HPLC 方法在不同尺寸的色谱柱之间转移。输入两种色谱柱的几何参数及原方法，即可得到换算后的流速、进样量和梯度时间。
mL/min
µL
min
新流速0.601 mL/min
- 新进样量
- 1.39 µL
- 新梯度时间
- 5.2 min
使用方法
将 HPLC 方法转移到不同尺寸的色谱柱——例如转移到更窄、更短的亚 2 µm 色谱柱以节省溶剂和时间——需要按比例调整方法，以保持色谱分离效果等效。本计算器从几何角度调整三项参数。流速随柱横截面积（内径的平方）放大，并与粒径成反比，以保持线速度恒定。进样量随柱体积（内径² × 柱长）放大。梯度（或运行）时间随柱体积除以流速变化量放大。
输入原色谱柱与目标色谱柱的尺寸，以及当前的流速、进样量和梯度时间，即可计算出新色谱柱的等效数值。转移后应通过实验验证关键分离效果。
示例
- 从 4.6×150 mm、5 µm 转移到 2.1×50 mm、2.6 µm 会降低流速和体积。
- 流速随内径的平方放大，并与粒径成反比。
- 进样量随柱体积放大。
常见问题
- 为什么要在色谱柱之间按比例转移方法？
- 为了保持分离效果等效。较小的色谱柱需要按比例减少流速、进样量和梯度时间，才能重现原有的色谱分离效果。
- 流速是如何按比例变化的？
- 按内径比的平方变化，并与粒径成反比，从而使填料内的线速度保持恒定。
- 进样量和梯度时间是如何变化的？
- 进样量随柱体积（内径² × 柱长）变化；梯度时间随柱体积除以流速变化量变化。
- 转移结果是否精确？
- 这只是一个几何起点。由于系统滞留体积和柱外效应的差异，你应通过实验验证关键分离效果。