Calculadora de Receitas de Tampão
Escale um tampão comum de biologia molecular para qualquer volume. Escolha uma receita e introduza o volume pretendido — as quantidades dos ingredientes são calculadas automaticamente.
Para preparar 500 mL de 1X TBS (Tris-buffered saline):
- Tris base1,21 g
- Sodium chloride (NaCl)4 g
pH alvo: 7.5
Dissolve in ~900 mL water, adjust to pH 7.5 with HCl, then top up to the final volume.
Como funciona
Os tampões de laboratório são definidos por concentrações fixas, pelo que as quantidades dos ingredientes escalam linearmente com o volume preparado. Esta calculadora contém receitas canónicas dos tampões mais utilizados em Western blot e em uso geral — TBS, TBST, PBS, PBST, e tampões de bloqueio com 5% de leite ou BSA — e multiplica cada ingrediente pelo volume alvo.
As massas são indicadas em gramas e os líquidos em mililitros. Dissolva os sólidos na maior parte da água, ajuste ao pH alvo quando indicado e, depois, complete até ao volume final para que as concentrações fiquem corretas. Os tampões de bloqueio devem ser preparados de fresco.
Exemplos
- 500 mL de TBS 1X precisam de 1,21 g de Tris base e 4 g de NaCl.
- O TBST é TBS mais 0,1% de Tween-20 (1 mL por litro).
- O tampão de bloqueio a 5% é 50 g de leite ou BSA por litro de TBST.
Perguntas frequentes
- Como escalam as receitas de tampão?
- Linearmente com o volume — como a concentração é fixa, cada ingrediente é simplesmente proporcional à quantidade de tampão preparada.
- Porquê completar até ao volume depois de misturar?
- Dissolver sólidos altera ligeiramente o volume. Adicionar água até à marca final depois de dissolver mantém as concentrações corretas.
- Leite ou BSA para bloqueio?
- O leite em pó magro é económico e funciona para a maioria dos anticorpos; o BSA é preferido para anticorpos fosfo-específicos porque o leite contém fosfoproteínas.
- Posso armazenar estes tampões?
- TBS e PBS conservam-se bem no frigorífico; adicione o Tween de fresco se armazenar por longos períodos. Os tampões de bloqueio com leite ou BSA devem ser preparados de fresco.