Buffer-receptcalculator
Schaal een veelgebruikte moleculair-biologische buffer naar elk volume. Kies een recept en voer het gewenste volume in — de ingrediënthoeveelheden worden voor u berekend.
Om 500 mL 1X TBS (Tris-buffered saline) te maken:
- Tris base1,21 g
- Sodium chloride (NaCl)4 g
Streef-pH: 7.5
Dissolve in ~900 mL water, adjust to pH 7.5 with HCl, then top up to the final volume.
Hoe het werkt
Labbuffers worden gedefinieerd door vaste concentraties, dus de ingrediënthoeveelheden schalen lineair met het volume dat u maakt. Deze calculator bevat standaardrecepten voor de meestgebruikte Western-blot- en algemene buffers — TBS, TBST, PBS, PBST, en 5% melk- of BSA-blokkeerbuffers — en vermenigvuldigt elk ingrediënt met uw streefvolume.
Massa's worden gegeven in gram en vloeistoffen in milliliter. Los de vaste stoffen eerst op in het grootste deel van het water, stel indien aangegeven de streef-pH bij, en vul dan aan tot het eindvolume zodat de concentraties kloppen. Blokkeerbuffers maakt u het beste vers klaar.
Voorbeelden
- 500 mL 1X TBS vereist 1,21 g Tris-base en 4 g NaCl.
- TBST is TBS plus 0,1% Tween-20 (1 mL per liter).
- 5% blokkeerbuffer is 50 g melk of BSA per liter TBST.
Veelgestelde vragen
- Hoe schalen buffer-recepten?
- Lineair met het volume — omdat de concentratie vast is, is elk ingrediënt simpelweg evenredig met de hoeveelheid buffer die u maakt.
- Waarom na het mengen aanvullen tot volume?
- Het oplossen van vaste stoffen verandert het volume licht. Door na het oplossen water toe te voegen tot de eindmarkering blijven de concentraties nauwkeurig.
- Melk of BSA voor blokkering?
- Magere melk is goedkoop en werkt voor de meeste antilichamen; BSA verdient de voorkeur voor fosfospecifieke antilichamen omdat melk fosfoproteïnen bevat.
- Kan ik deze buffers bewaren?
- TBS en PBS blijven goed gekoeld houdbaar; voeg bij langdurige opslag vers Tween toe. Blokkeerbuffers met melk of BSA kunt u het beste vers maken.