OD260から濃度への計算ツール
260 nmでの分光光度計測定値を核酸濃度に変換します。吸光度と希釈倍率を入力し、核酸の種類を選択してください。A280の値も入力すると純度比が得られます。
濃度50 µg/mL
- ng/µL
- 50
- A260/A280
- —
使い方
核酸は260 nmで紫外線を吸収し、吸光度は濃度に比例します。吸光度1単位 (A260 = 1、光路長1 cm) は、二本鎖DNAで約50 µg/mL、一本鎖DNAで33 µg/mL、一本鎖RNAで40 µg/mLに相当します。したがって濃度は A260 × 希釈倍率 × 種類係数 で求められ、1 µg/mLは1 ng/µLに等しいため、両単位は同じ数値になります。
測定した吸光度と使用した希釈倍率を入力し、核酸の種類を選んでください。280 nmでも吸光度を測定した場合、それを入力するとA260/A280純度比が得られます — 純粋なDNAではおよそ1.8、純粋なRNAでは2.0で、値が低いほどタンパク質やフェノールの混入を示します。
使用例
- dsDNAのA260が1.0（希釈倍率1）= 50 µg/mL。
- RNAでA260が0.5、100倍希釈 = 0.5 × 100 × 40 = 2000 µg/mL。
- A260/A280が約1.8であれば、純粋なDNAを示します。
よくある質問
- A260からどのように濃度が得られますか？
- 核酸は260 nmで濃度に比例して吸収します。吸光度に希釈倍率と種類ごとの係数 (OD1あたり50、33、または40 µg/mL) を掛けると濃度が得られます。
- 係数が50、33、40である理由は何ですか？
- これらは、光路長1 cmで260 nmの吸光度1を与える二本鎖DNA、一本鎖DNA、一本鎖RNAの量として経験的に定められた値です。
- A260/A280比とは何ですか？
- 純度の指標です。純粋なDNAは比率が1.8前後、純粋なRNAは2.0前後で、それより明らかに低い値はタンパク質やフェノールの混入を示唆します。
- µg/mLとng/µLは同じですか？
- 数値としては同じです。1マイクログラム毎ミリリットルは1ナノグラム毎マイクロリットルに等しいため、濃度の値はどちらの単位でも同じになります。