HPLCメソッド移行計算機
分離能を同等に保ちながら、異なるサイズのカラム間でHPLCメソッドを移行します。両方のカラム形状と元のメソッドを入力すると、スケーリングされた流速、注入量、グラジエント時間が求められます。
mL/min
µL
min
新しい流速0.601 mL/min
- 新しい注入量
- 1.39 µL
- 新しいグラジエント時間
- 5.2 min
使い方
HPLCメソッドを異なるサイズのカラム(例えば溶媒と時間を節約するため、より細く短い2µm以下の粒子径のカラム)に移行するには、クロマトグラフィーの同等性を保つようメソッドをスケーリングする必要があります。この計算機は幾何学的に3つの値を調整します。流速はカラム断面積(内径の2乗)に比例し、粒子径に反比例させることで線速度を一定に保ちます。注入量はカラム体積(直径² × 長さ)に比例します。グラジエント(実行)時間はカラム体積を流速の変化で割った値に比例します。
元と目標のカラム寸法、および現在の流速、注入量、グラジエント時間を入力すると、新しいカラムでの同等の値が計算されます。移行後は重要な分離を実験的に確認してください。
使用例
- 4.6×150mm、5µm → 2.1×50mm、2.6µmへの移行では、流速と体積が小さくなります。
- 流速は内径の2乗に比例し、粒子径に反比例します。
- 注入量はカラム体積に比例します。
よくある質問
- なぜカラム間でメソッドをスケーリングするのですか?
- 分離能を同等に保つためです。小さいカラムでは、元のクロマトグラフィーを再現するために流速、注入量、グラジエント時間を比例して減らす必要があります。
- 流速はどのようにスケーリングされますか?
- 内径の比の2乗に比例し、粒子径に反比例することで、充填剤内の線速度が一定に保たれます。
- 注入量とグラジエントはどのようにスケーリングされますか?
- 注入量はカラム体積(直径² × 長さ)に比例し、グラジエント時間はカラム体積を流速の変化で割った値に比例します。
- この移行は正確ですか?
- 幾何学的な出発点にすぎません。システムのデッドボリュームやカラム外効果の違いがあるため、重要な分離は実験的に確認する必要があります。