Calcolatore ricette buffer
Scala un buffer comune di biologia molecolare a qualsiasi volume. Scegli una ricetta e inserisci il volume desiderato — le quantità degli ingredienti vengono calcolate per te.
Per preparare 500 mL di 1X TBS (Tris-buffered saline):
- Tris base1,21 g
- Sodium chloride (NaCl)4 g
pH target: 7.5
Dissolve in ~900 mL water, adjust to pH 7.5 with HCl, then top up to the final volume.
Come funziona
I buffer di laboratorio sono definiti da concentrazioni fisse, quindi le quantità degli ingredienti scalano linearmente con il volume preparato. Questo calcolatore contiene le ricette canoniche dei buffer più usati per Western blot e uso generale — TBS, TBST, PBS, PBST e buffer di blocco al 5% con latte o BSA — e moltiplica ogni ingrediente per il volume target.
Le masse sono espresse in grammi e i liquidi in millilitri. Sciogli i solidi nella maggior parte dell'acqua, aggiusta il pH target dove indicato, quindi porta a volume finale così le concentrazioni risultano corrette. I buffer di blocco è meglio prepararli freschi.
Esempi
- 500 mL di TBS 1X richiedono 1,21 g di Tris base e 4 g di NaCl.
- Il TBST è TBS più 0,1% di Tween-20 (1 mL per litro).
- Il buffer di blocco al 5% è 50 g di latte o BSA per litro di TBST.
Domande frequenti
- Come scalano le ricette dei buffer?
- Linearmente con il volume — poiché la concentrazione è fissa, ogni ingrediente è semplicemente proporzionale alla quantità di buffer preparata.
- Perché portare a volume dopo aver mescolato?
- Sciogliere i solidi cambia leggermente il volume. Aggiungere acqua fino al segno finale dopo la dissoluzione mantiene accurate le concentrazioni.
- Latte o BSA per il blocco?
- Il latte scremato è economico e funziona per la maggior parte degli anticorpi; il BSA è preferibile per gli anticorpi fosfo-specifici perché il latte contiene fosfoproteine.
- Posso conservare questi buffer?
- TBS e PBS si conservano bene in frigorifero; aggiungi il Tween fresco se li conservi a lungo. I buffer di blocco con latte o BSA vanno preparati freschi.