Calculateur OD260 vers concentration
Convertissez une lecture de spectrophotomètre à 260 nm en concentration d'acide nucléique. Entrez l'absorbance et le facteur de dilution, choisissez le type d'acide nucléique, et ajoutez éventuellement la lecture A280 pour obtenir le ratio de pureté.
- ng/µL
- 50
- A260/A280
- —
Comment ça marche
Les acides nucléiques absorbent la lumière ultraviolette à 260 nm, et l'absorbance est proportionnelle à la concentration. Une unité d'absorbance (A260 = 1, trajet de 1 cm) correspond à environ 50 µg/mL d'ADN double brin, 33 µg/mL d'ADN simple brin, ou 40 µg/mL d'ARN simple brin. La concentration est donc A260 × facteur de dilution × le facteur de type, et comme 1 µg/mL équivaut à 1 ng/µL, les deux unités partagent le même nombre.
Entrez l'absorbance mesurée et le facteur de dilution utilisé, et choisissez le type d'acide nucléique. Si vous avez aussi lu l'absorbance à 280 nm, l'entrer donne le ratio de pureté A260/A280 — environ 1,8 pour l'ADN pur et 2,0 pour l'ARN pur, des valeurs plus basses indiquant une contamination par des protéines ou du phénol.
Exemples
- A260 de 1,0 pour l'ADNdb (dilution 1) = 50 µg/mL.
- A260 de 0,5 dilué 100× pour l'ARN = 0,5 × 100 × 40 = 2000 µg/mL.
- Un A260/A280 d'environ 1,8 indique un ADN pur.
Questions fréquentes
- Comment l'A260 donne-t-il la concentration ?
- Les acides nucléiques absorbent à 260 nm proportionnellement à la concentration. Multiplier l'absorbance par le facteur de dilution et un facteur spécifique au type (50, 33 ou 40 µg/mL par OD) donne la concentration.
- Pourquoi les facteurs sont-ils 50, 33 et 40 ?
- Ce sont les quantités établies empiriquement d'ADN double brin, d'ADN simple brin et d'ARN simple brin qui donnent une absorbance de 1 à 260 nm sur un trajet de 1 cm.
- Qu'est-ce que le ratio A260/A280 ?
- C'est un indicateur de pureté. L'ADN pur a un ratio proche de 1,8 et l'ARN pur proche de 2,0 ; un ratio nettement plus bas suggère une contamination par des protéines ou du phénol.
- µg/mL est-il identique à ng/µL ?
- Oui, numériquement. Un microgramme par millilitre équivaut à un nanogramme par microlitre, donc la valeur de concentration est la même dans les deux unités.