Calculadora de Master Mix para PCR
Escala un master mix de PCR a cualquier número de reacciones. Define tus volúmenes por reacción, el número de reacciones y un exceso para compensar pérdidas de pipeteo, y obtén el total de cada reactivo.
| Componente | Por reacción (µL) | Total (µL) |
|---|---|---|
| 10X reaction buffer | 27,5 µL | |
| dNTP mix (10 mM) | 5,5 µL | |
| Forward primer (10 µM) | 5,5 µL | |
| Reverse primer (10 µM) | 5,5 µL | |
| Taq polymerase | 1,38 µL |
Distribuye 4,13 µL de master mix por tubo y luego añade el molde.
Cómo funciona
Un master mix de PCR reúne todos los reactivos compartidos entre tus reacciones — buffer, dNTP, cebadores y polimerasa — en un solo tubo, para que los pipetees una vez y repartas cantidades iguales. Esta calculadora multiplica cada volumen por reacción por el número de reacciones, más un porcentaje de exceso para cubrir las pequeñas pérdidas del pipeteo.
Un exceso típico es del 5–10%: preparar mezcla para unas reacciones adicionales asegura que el último tubo reciba igualmente un volumen completo y preciso. El ADN molde se añade a cada tubo por separado (no al master mix), así que el volumen de master mix por tubo mostrado es lo que dispensas antes de añadir tu muestra.
Ejemplos
- Para 10 reacciones con 10% de exceso, cada reactivo se escala ×11.
- El molde se añade por tubo, no al master mix compartido.
- El exceso cubre la pérdida de pipeteo para que el último tubo quede completo.
Preguntas frecuentes
- ¿Qué es un master mix de PCR?
- Un único tubo premezclado con todos los reactivos comunes a tus reacciones, repartido a partes iguales para que cada tubo sea idéntico y pipetees menos veces.
- ¿Por qué añadir exceso?
- El pipeteo pierde algo de volumen en cada transferencia. Preparar un 5–10% extra asegura que las últimas reacciones reciban también una cantidad completa y precisa.
- ¿El molde va en el master mix?
- No — el ADN molde difiere en cada muestra, así que se añade a cada tubo por separado después de dispensar el master mix compartido.
- ¿Puedo cambiar los volúmenes?
- Sí. Edita cualquier volumen por reacción en la tabla según tu protocolo; los totales se actualizan automáticamente.