Calculadora de OD260 a Concentración
Convierte una lectura de espectrofotómetro a 260 nm en concentración de ácido nucleico. Introduce la absorbancia y el factor de dilución, elige el tipo de ácido nucleico y, opcionalmente, añade la lectura A280 para obtener la relación de pureza.
- ng/µL
- 50
- A260/A280
- —
Cómo funciona
Los ácidos nucleicos absorben la luz ultravioleta a 260 nm, y la absorbancia es proporcional a la concentración. Una unidad de absorbancia (A260 = 1, camino óptico de 1 cm) corresponde a unos 50 µg/mL de ADN bicatenario, 33 µg/mL de ADN monocatenario o 40 µg/mL de ARN monocatenario. La concentración es, por tanto, A260 × factor de dilución × el factor del tipo, y como 1 µg/mL equivale a 1 ng/µL, las dos unidades comparten el mismo número.
Introduce la absorbancia medida y el factor de dilución utilizado, y elige el tipo de ácido nucleico. Si también mediste la absorbancia a 280 nm, introducirla da la relación de pureza A260/A280 — aproximadamente 1.8 para ADN puro y 2.0 para ARN puro, con valores más bajos que indican contaminación por proteína o fenol.
Ejemplos
- A260 de 1.0 para ADNds (dilución 1) = 50 µg/mL.
- A260 de 0.5 diluido 100× para ARN = 0.5 × 100 × 40 = 2000 µg/mL.
- Un A260/A280 de aproximadamente 1.8 indica ADN puro.
Preguntas frecuentes
- ¿Cómo da la A260 la concentración?
- Los ácidos nucleicos absorben a 260 nm en proporción a la concentración. Multiplicar la absorbancia por el factor de dilución y un factor específico del tipo (50, 33 o 40 µg/mL por OD) da la concentración.
- ¿Por qué los factores son 50, 33 y 40?
- Son las cantidades establecidas empíricamente de ADN bicatenario, ADN monocatenario y ARN monocatenario que dan una absorbancia de 1 a 260 nm en un camino óptico de 1 cm.
- ¿Qué es la relación A260/A280?
- Es un indicador de pureza. El ADN puro tiene una relación cercana a 1.8 y el ARN puro cercana a 2.0; una relación notablemente más baja sugiere contaminación por proteína o fenol.
- ¿Es µg/mL lo mismo que ng/µL?
- Sí, numéricamente. Un microgramo por mililitro equivale a un nanogramo por microlitro, así que el valor de concentración es el mismo en ambas unidades.