Calculadora de Transferencia de Métodos HPLC
Transfiere un método HPLC entre columnas de tamaños distintos manteniendo la separación equivalente. Introduce ambas geometrías de columna y tu método original para obtener el flujo, el volumen de inyección y el tiempo de gradiente escalados.
- Nuevo volumen de inyección
- 1,39 µL
- Nuevo tiempo de gradiente
- 5,2 min
Cómo funciona
Pasar un método HPLC a una columna de tamaño distinto — por ejemplo, a una columna más estrecha, corta y de partícula sub-2-µm para ahorrar disolvente y tiempo — requiere escalar el método para que la cromatografía se mantenga equivalente. Esta calculadora ajusta tres cosas geométricamente. El caudal escala con la sección transversal de la columna (diámetro interno al cuadrado) e inversamente con el tamaño de partícula, para mantener constante la velocidad lineal. El volumen de inyección escala con el volumen de la columna (diámetro² × longitud). El tiempo de gradiente (o de corrida) escala con el volumen de la columna dividido por el cambio de caudal.
Introduce las dimensiones de la columna original y la de destino junto con tu flujo, inyección y tiempo de gradiente actuales, y se calculan los valores equivalentes para la nueva columna. Verifica experimentalmente las separaciones críticas después de la transferencia.
Ejemplos
- Pasar de 4.6×150 mm, 5 µm → 2.1×50 mm, 2.6 µm reduce el flujo y los volúmenes.
- El caudal escala con el diámetro² y de forma inversa con el tamaño de partícula.
- El volumen de inyección escala con el volumen de la columna.
Preguntas frecuentes
- ¿Por qué escalar un método entre columnas?
- Para mantener la separación equivalente. Una columna más pequeña necesita proporcionalmente menos flujo, inyección y tiempo de gradiente para reproducir la cromatografía original.
- ¿Cómo escala el caudal?
- Con la razón de diámetros internos al cuadrado, y de forma inversa con el tamaño de partícula, para que la velocidad lineal a través del empaque se mantenga constante.
- ¿Cómo escalan el volumen de inyección y el gradiente?
- El volumen de inyección escala con el volumen de la columna (diámetro² × longitud); el tiempo de gradiente escala con el volumen de la columna dividido por el cambio de caudal.
- ¿Es exacta la transferencia?
- Es un punto de partida geométrico. Las diferencias en el volumen muerto del sistema y los efectos extracolumna implican que debes verificar experimentalmente las separaciones críticas.