Calculadora de Recetas de Buffer
Escala un buffer común de biología molecular a cualquier volumen. Elige una receta e introduce el volumen deseado — las cantidades de ingredientes se calculan por ti.
Para preparar 500 mL de 1X TBS (Tris-buffered saline):
- Tris base1,21 g
- Sodium chloride (NaCl)4 g
pH objetivo: 7.5
Dissolve in ~900 mL water, adjust to pH 7.5 with HCl, then top up to the final volume.
Cómo funciona
Los buffers de laboratorio se definen por concentraciones fijas, así que las cantidades de ingredientes escalan de forma lineal con el volumen que prepares. Esta calculadora incluye recetas estándar de los buffers más usados en Western blot y de uso general — TBS, TBST, PBS, PBST, y buffers de bloqueo al 5% con leche o BSA — y multiplica cada ingrediente por tu volumen objetivo.
Las masas se dan en gramos y los líquidos en mililitros. Disuelve los sólidos primero en la mayor parte del agua, ajusta al pH objetivo donde se indique, y luego completa hasta el volumen final para que las concentraciones queden correctas. Los buffers de bloqueo se preparan mejor en el momento.
Ejemplos
- 500 mL de TBS 1X necesitan 1.21 g de Tris base y 4 g de NaCl.
- TBST es TBS más 0.1% de Tween-20 (1 mL por litro).
- El buffer de bloqueo al 5% son 50 g de leche o BSA por litro de TBST.
Preguntas frecuentes
- ¿Cómo escalan las recetas de buffer?
- De forma lineal con el volumen — como la concentración es fija, cada ingrediente es simplemente proporcional a la cantidad de buffer que prepares.
- ¿Por qué completar hasta el volumen tras mezclar?
- Disolver los sólidos cambia ligeramente el volumen. Añadir agua hasta la marca final después de disolver mantiene las concentraciones precisas.
- ¿Leche o BSA para el bloqueo?
- La leche desnatada es barata y funciona para la mayoría de anticuerpos; el BSA es preferible para anticuerpos fosfoespecíficos porque la leche contiene fosfoproteínas.
- ¿Puedo almacenar estos buffers?
- TBS y PBS se conservan bien refrigerados; añade Tween en el momento si los almacenas a largo plazo. Los buffers de bloqueo con leche o BSA deben prepararse frescos.