Pufferrezept-Rechner
Skalieren Sie einen gängigen molekularbiologischen Puffer auf beliebiges Volumen. Wählen Sie ein Rezept und geben Sie das gewünschte Volumen ein — die Zutatenmengen werden für Sie berechnet.
Für 500 mL 1X TBS (Tris-buffered saline) benötigen Sie:
- Tris base1,21 g
- Sodium chloride (NaCl)4 g
Ziel-pH-Wert: 7.5
Dissolve in ~900 mL water, adjust to pH 7.5 with HCl, then top up to the final volume.
So funktioniert es
Laborpuffer sind durch feste Konzentrationen definiert, sodass die Zutatenmengen linear mit dem hergestellten Volumen skalieren. Dieser Rechner enthält gängige Rezepte für die meistgenutzten Western-Blot- und Standardpuffer — TBS, TBST, PBS, PBST sowie 5%ige Milch- oder BSA-Blockierpuffer — und multipliziert jede Zutat mit Ihrem Zielvolumen.
Massen werden in Gramm und Flüssigkeiten in Millilitern angegeben. Lösen Sie die Feststoffe zunächst im Großteil des Wassers, stellen Sie wo angegeben den Ziel-pH-Wert ein und füllen Sie dann auf das Endvolumen auf, damit die Konzentrationen stimmen. Blockierpuffer sollten möglichst frisch angesetzt werden.
Beispiele
- 500 mL 1X TBS benötigen 1,21 g Tris-Base und 4 g NaCl.
- TBST ist TBS plus 0,1 % Tween-20 (1 mL pro Liter).
- 5%iger Blockierpuffer entspricht 50 g Milch oder BSA pro Liter TBST.
Häufig gestellte Fragen
- Wie skalieren Pufferrezepte?
- Linear mit dem Volumen — da die Konzentration fest ist, ist jede Zutat einfach proportional zur hergestellten Puffermenge.
- Warum nach dem Mischen auf Volumen auffüllen?
- Das Lösen von Feststoffen verändert das Volumen leicht. Wird nach dem Lösen bis zur Endmarkierung mit Wasser aufgefüllt, bleiben die Konzentrationen genau.
- Milch oder BSA zum Blockieren?
- Fettfreie Milch ist günstig und für die meisten Antikörper geeignet; bei phosphospezifischen Antikörpern wird BSA bevorzugt, da Milch Phosphoproteine enthält.
- Kann ich diese Puffer lagern?
- TBS und PBS halten sich gekühlt gut; Tween bei längerer Lagerung erst frisch zugeben. Blockierpuffer mit Milch oder BSA sollten frisch angesetzt werden.